超微量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收特性來(lái)分析其中的物質(zhì)成分的儀器。它的基本原理是基于光的物質(zhì)吸收特性和蘭伯特-比爾定律。
光的物質(zhì)吸收特性:當(dāng)光通過(guò)樣品時(shí),樣品中的物質(zhì)會(huì)吸收光,吸收光的強(qiáng)度取決于物質(zhì)本身的吸收特性以及光的波長(zhǎng)。不同的物質(zhì)對(duì)特定波長(zhǎng)的光有不同的吸收程度。
蘭伯特-比爾定律:蘭伯特-比爾定律是分析的基礎(chǔ)。根據(jù)該定律,物質(zhì)溶液中的吸光度與物質(zhì)的濃度成正比,即A=εlc,其中A代表吸光度,ε代表摩爾吸光系數(shù),l代表光程長(zhǎng)度,c代表物質(zhì)濃度。
超微量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法:
1.打開(kāi)光度計(jì)電源并預(yù)熱。根據(jù)儀器說(shuō)明書(shū)上的指示,將儀器通電并等待一段時(shí)間,使其穩(wěn)定到待機(jī)溫度。
2.調(diào)節(jié)樣品室。將一條白光平衡樣品放入樣品室,將其蓋上,并使用儀器的調(diào)節(jié)功能,確保樣品室內(nèi)腔溫度的均勻性以及光路的正常運(yùn)行。
3.準(zhǔn)備樣品。取適量的待測(cè)溶液,使用容量瓶或移液器將其加入樣品室。確保樣品室內(nèi)沒(méi)有氣泡或雜質(zhì)。
4.設(shè)置波長(zhǎng)。根據(jù)待測(cè)溶液的特性,選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)。通常,使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí),選擇200-800nm的范圍內(nèi)的波長(zhǎng)。
5.設(shè)置基線。使用帶有待測(cè)溶液或純?nèi)軇┑臉悠肥?,設(shè)置基線。調(diào)整光度計(jì)使其讀數(shù)為零。
6.測(cè)量樣品吸光度。將待測(cè)溶液放入樣品室,關(guān)閉樣品室,并按下“測(cè)量”按鈕,光度計(jì)將自動(dòng)測(cè)量樣品的吸光度。
7.記錄測(cè)量結(jié)果。根據(jù)測(cè)量結(jié)果,在數(shù)據(jù)記錄器或計(jì)算機(jī)上記錄吸光度值。如果需要,可以進(jìn)行多次測(cè)量并求平均值。
8.清洗樣品室。測(cè)量完畢后,及時(shí)清洗樣品室,防止樣品殘留物對(duì)儀器的影響。
以上是一般超微量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法,請(qǐng)注意:具體的使用方法可能因儀器型號(hào)和制造商的不同而有所差異,建議在使用前詳細(xì)閱讀儀器的使用手冊(cè)和操作指南。